ELISA检测试剂盒组成:
1:浓缩洗涤←液(50ml)20x
2.标本稀释液(12ml)
3.终止液(12ml)
4.标准品(2管)
5.酶标抗体稀释液体(12ml)
6.第一抗体稀释液(12ml)
7.包被▽酶标板一块
8.坐标纸一张
9.封板纸一↑张
样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆∑ 等。1ml的全血可得到0.5ml的◣血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
1.注意事项:
收集标本前必须♂清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期∴收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条¤件下保存。避☆免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
2.液体类标本
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等◣。1ml的全血可得到0.5ml的血清∩或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
3. 血清:
室温血⌒ 液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再◇次离心。
血浆:
应根据试剂盒的★要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v )抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集ζ 上清。如有沉淀形成,应再次╱离心。
4.尿液、胸腹水、脑脊液:
用无▼菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集∞上清。如有沉淀形成,应再次离㊣ 心。
5.细胞培养上清:
检测分泌性的成份〗时,用无菌管√收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上】清。检测细●胞内的成份时㊣,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形ξ成,应再次离心。
6. 组织标本:
切割〓标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑◎制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置︽于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干ξ 燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。