小鼠L选择素(L-selectin)ELISA试剂盒实验
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠L选择素(L-selectin/CD62L)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠L选择素(L-selectin/CD62L)呈正相关。用酶标仪︽在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
小鼠L选择素(L-selectin)ELISA试剂盒实验操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温∏平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常¤现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组◣分使用前充分摇匀。
小鼠L选择素(L-selectin)ELISA试剂盒实验
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
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