谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测试盒说明书一、实验仪器：试管、微量移液器、旋涡混匀器、离心机、37℃恒温水浴锅、可见分光光度计（波长 412nm）。二、适用范围：本试剂盒可测动物血清、血浆、组织以及全血、红细胞中的 GSH-PX 的活力。三、测定意义：谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解的酶，它特异地催化还原型谷胱甘肽（GSH）对氢过氧化物的还原反应。一般认为它←在细胞内能清除有害的过氧化物代谢产物，阻断脂质过氧化链锁反应，从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。此酶含硒，硒是 GSH-PX的必须组成部分。每克分子酶含 4 克分子原子硒。GSH—PX 的活性中心是硒半胱氨酸。测定 GSH-PX 活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。四、操作表：1、酶促反应：(试剂一应用液提前在 37oC 预温)对照管1mmol/L GSH（ml）待测溶血液（ml）试剂一应用液试剂二（ml）待测溶血液（ml） 37oC 水浴预温 5 分钟 0.1 37oC 水浴准确反应 5 分钟 20.20.2测定管0.20.20.12 混匀，3500～4000 转/分，离心 10 分钟，取上清 1ml 作显色反应。2、显色反应：空白管GSH 标准品溶剂应用液（ml）20μmol/L GSH 标准液（ml）上清液（ml）试剂三应用液（ml）试剂四应用液（ml）试剂五应用液（ml）10.250.0510.250.0511110.250.05110.250.05标准管对照管测定管混匀，室温静置 15 分钟后，412nm 处，1cm 光径比色杯，双蒸水调零，测各管 OD 值。 五、计算公式：1、全血中 GSH—PX 活力的计算：定义：规定每 4μl 全血在 37℃反应 5 分钟，扣除非酶促反应的作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1μmol/L 为一个酶活力单位。 2、组织中 GSH—PX 活力的计算：定义：规定为每毫克蛋白质，每分钟扣除非酶反应的作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1μmol/L为一个酶活力单位。 3、血清中 GSH—PX 酶活力的计算：定义：规定每 0.1ml 血清在 37℃反应 5 分钟，扣除非酶促反应作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1μmol/L 为一个酶活力单位。