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                免疫组化试剂盒使用说明书

                教育装备采购网 2014-01-06 17:13 围观712次
                免疫组化试剂盒使用说明书保存方法:2-8℃保存。有效期:一年。生产日期:见封口。工作原理:辣根过氧化物酶(HRP)的分子量(40000),它不会遮盖抗原的结合部位,具有较高活性及特︾异性,可溶性佳,生成的产物不扩散,可作用于多种底物,产生不同颜色且HRP穿透力强,易进入细胞内。DAB在 H2O2存在的卐情况下,可以作为HRP的电子供体,产生褐色的不溶颗粒,可作为显色的试剂。试剂盒内容: 名称 规格1 5%BSA 15mL2 二抗 0.5 mL(未稀释的)3 H2O 2 10 mL4 DAB显色液 10 mL5 枸橼酸盐缓冲液 15ml操作步骤:1、防脱片剂处理◤后的切片在二甲苯中脱蜡,然后系列酒精梯度入水,每次3~5 min。2、0.01mol/L pH7.4 PBS洗涤3次,每次5 min 。3、3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗涤2-3次,每次5 min;4、0.01mol/L pH6.0柠檬酸缓冲液(气管在80~88℃,其他组织92℃)复性20min,在溶液中冷却至室温。0.01 mol/L pH7.4的PBS洗涤3次,每次5 min 。5、加入封闭液,于湿盒中Ψ感作30min,甩去多余的封闭液。 6、滴加血清到切片上37℃孵育1小时左右或者4℃过夜, 0.01 mol/LpH7.4的PBS洗涤3次,每次5 min 。7、滴加FITC或者HRP酶标二抗,覆盖切片,置湿盒中37℃闭光感作30min左右,取出后↙洗涤(方法同上)。8、DAB显色。9、苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观【察。
                普教「会专题840*100

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