上海恒远生物公布小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离心法的实际操作步骤，本次▽实验由我司技术亲自研发指导检测，我司elisa试剂盒提供完善的售后服务及其技术指导，你有任何问题均可来电咨询，小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离∩心法操作步骤如下：
一、小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离心法原理
根据物理学颗粒沉降原理，不同密度的颗粒在其沉降运动中可因其比重的差别而处于不同的分布位置。利用此原理可设计一定比重的液体界面，将小☆鼠脾脏中各种不同比重的细胞通过离心沉降而达到使其彼此分离的目的。已知小鼠淋巴细胞和单核细胞的比重为1.088左右，而红细胞与粒细胞的比重均大→于1.088。因此，若用比重为1.088±0.001的分离液则可通过密度◣梯度离心方法，在分离液界面上收集得到脾单个核细胞。
二、小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离心法器材与试剂
1.器材：
(1)水平式离心机(2)显微镜、擦镜纸(3)血球计数Ψ板、血盖片
2.试剂：
(1)小鼠脾脏细胞悬液
(2)淋巴细胞分离液(F)(比重：1.088±0.001)
(3)生理盐水(0.9%氯化钠注↘射液)
(4)白细胞稀释液(WD)
(5)0.5%锥兰溶液
三、小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离心法操作步骤
1. 将2ml小鼠脾脏〇细胞悬液混匀，然后用滴管沿盛有2ml淋巴细胞分离液的试管壁轻轻铺于分离液面上。
2. 将该试管置水平式离心机中1800rpm离心15min。
3. 用滴管小心「直接插入白色絮状的细胞层，吸出界面层细胞，移入另一试管中。
4. 加入足量生理盐水，用滴管轻轻上下混匀，然后1000rpm离心10min，弃去上清液，将沉淀细胞充分摇匀，然后用生理盐水再离心洗涤1次，弃去上清液后充分摇匀沉淀细胞。
5. 用生理盐水稀释沉淀细胞至0.3ml(约加6滴)，混匀。
6. 取细胞悬液一滴加入等量白细胞稀释液于另一试管中充分混匀，用计数板在显微镜下计ω数，计算出淋巴细胞浓度(个/ml)。
7. 检查细胞活力：取细胞悬液一滴，加入等量锥兰溶液于另一试管中，充分混匀后立即滴∞一滴细胞悬液于载玻片上，在显微镜下计数100~200个淋巴细胞中着色的死细胞数。
四、小鼠脾单个核细胞的分离—密度梯度离心法实验结果记录与分析
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