生物样㊣品预处理-样品冷冻干燥及结合】物水解

　　生物样品预处理

　　-样品冷冻干燥及结合物水解

　　1.1样品冷冻干燥

　　冷冻干燥是一种储存和预处理生物样ω品的有效方法，但其针对性比较强，主要适用于大量和被检测药物的水溶性比较强样品，此方法也适用于♂挥发性较强的药物。此外还有一种情况就是有些被测药物需要衍生才能被检测到，若采用液-液萃取则需要进行样品浓缩，在一定温度下会导致被测药物分解，此时采用冷冻方法最为合适。

　　基本原理是将样品冷冻，其中的水分会形成冰壳附着在样品表面，增大了≡挥发面积，再将其放入冻干机减压，冰则直接※升华，其他杂质也会一并挥发掉。但如果被测药物挥发性过强，也可能损失一ぷ部分。

　　冷冻干燥生物样品时可先将其置←于冰-丙酮浴，液氮中或其他低温条件下。半固体样品如粪便、组〇织等冷冻时间为1-10min即可放入冻干机中。

　　1.2结合物水解

　　药物在体内第二相代谢反应之后，常形成葡萄苷酸或硫酸脂等结合物。使一些药物无法以游№离状态存在。如果想要检测母体药物浓度就需要将其水」解后再进行测定。

　　1.2.1 酸水解

　　酸水解，通常使用无机酸，如尿样中结合物水解可加入适量的盐酸溶液。至于加入盐酸的浓度、酸化时间及加热温度则需要根据具体实验↓而定。有的药物结合物水解需要温和的实验条件，如加入0.5moL/L盐酸后放置15min即可，有的则需要剧烈的▲实验条件，如加入3moL/L盐酸后还必须煮沸█1h，水解后样品成酸性，必要时刻加入碱性物质调整pH值再进行药物提取。

　　1.2.2 酶水解

　　酶水解是专』属性很强的一种水解方法，使用最为广泛的的水解酶是β-葡萄糖苷酸□酶(β-glucuronidase)和芳基硫酸酯酶(arylsulfatase)，前者可专门水解药物的葡萄糖醛酸苷。后者水解药物的硫酸酯。也可用两者的混合物将两者同时★水解。尿液中含有葡萄苷酸或硫酸脂两种物质，故使用混『合酶更具有实用价值，大致步骤为按照不同酶试剂要求控制一定的pH值(4.5-7.0)加入水解酶后□　厌氧温育16h。

　　1.2.3 溶剂解

　　某些药物或内源化合物的硫酸酯，可随加入的萃取溶剂，再萃取过程中发生分解，通常称为溶剂∮解。其也是一种较温和的水解方法。如尿液中◣的甾体激素硫酸脂结合物，再pH为1条件下加入乙酸乙酯萃取时，则发生分解，释放出的甾体激素被萃如乙酸乙酯中。

　　水解反应温≡度很重要，有些实验还需要反应的同时进行摇晃振荡，我公司可提供以下仪〓器。

　　HWT系列恒温水浴箱

　　仪器介绍

　　HWT系列恒温水浴箱为实验室加热恒温的常规装置。现广泛用于微生物临床试验室培养、恒温反应、样品浓缩及其◥他常规实验中。

　　主要特点

　　1.温度调节采用PID技术、数字显示。

　　2.先进的PTC加热元件，升温平稳。运行安全可靠。

　　3.装置表面使用不锈钢材料，耐腐蚀性强。

　　4.触摸式调节按键，温度⊙调节方便自如。

　　技术参数